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| 临床病理切片操作注意事项 |
| 2011-06-13 |
病理切片检查时，如果组织脱水程序出现问题或没有脱水，组织成分经常会出现“冰晶”现像，病理切片检查时应注意：
1、调节好冰冻切片机的温度，温度太高组织太 软不能切出片子，温度太低组织过硬切片容易破碎。要根据 不同的组织调节好冰冻机的温度：如肝、脾、肾最佳的温度 是－22~-20 ℃；脂肪组织温度应低，一般为－30~-25 ℃为宜； 乳腺组织应在－25~－20 ℃。准备好刀片，选择锋利的刀片，调 节切片刀与组织块之间成5°夹角。准备好取材使用的器械， 准备好包埋剂、毛刷、载玻片、固定液、染色剂等必需用品。
2、标本送检、取材注意事项：送检标本必须尽量缩短途中 时间，保证标本新鲜。取材尽量避开坏死组织、骨组织及手术 缝线等异物。所取组织应具有代表性，切除非诊断需要的脂 肪、皮肤等多余组织。取材时器械要擦干，组织避免遇水，若不 慎遇水可迅速用滤纸吸干，以防止冰晶的形成，因为冰晶会引 起细胞间针状裂隙，导致正常结构改变，细胞核普遍增大，容 易导致误诊。
3、 速冻：取好的组织应尽快放入冰冻切片机内速冻，可减 少冰晶形成，当冻头上组织的下1/2~2/3 速冻变白时，可用冰 锤压在组织上可使组织形成一平面，这样能更方便、更快捷修 切组织块，为避免冰锤黏附组织造成交叉污染，可在冰锤与组 织间放置一小块保鲜膜，并一次使用。
4、修片时应充分暴露组织最大切面，带有 包膜的组织须切出包膜，以便观察肿物是否浸润。但修片时也 必须注意观察重点病变的微小病灶，避免修切过度，造成漏 诊。切片厚度5~6 μm，淋巴结切片3 μm 为宜。
5、 固定、染色要点：冰冻切片如果固定不及时、固定时间不 足均会影响到固定效果。可使用AFF 固定液，每天更换新鲜 试剂，固定时间1 min，固定效果很好。要认真掌握苏木素的 温度、染色的时间，如果染色过久颜色太深，分化时间就应延 长；如果细胞核着色不够应增加染色时间；伊红染色太深可在 过85%酒精时多荡洗片刻。 总之，进行冰冻切片必须有高度的责任心，严格实验操 作，避免不良现象发生，经常做实验后的总结工作，不断优化 实验方法，可制作出优良的冰冻切片。 |
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